流行性出血热
流行性出血热(epidemichemorrhagicfever，EHF)是一种由病毒传染的自然疫源性疾病，流行广泛，危害严重。至今，流行性出血热还是一种严重危害我国广大人民群众健康的传染性疾病。
流行性出血热在不同的国家和地区，由于其病原、流行病学及临床特征不同，曾有过多种不同的名称。如我国和日本将其称之为“流行性出血热”；朝鲜称之为“朝鲜出血热”；苏联称之为“出血性肾炎肾病”；北欧称之为“流行性肾病”等。实际上，不同国家和地区的流行性出血热，无一例外地都有不同程度的肾脏损害，故1982年世界卫生组织(WHO)统一将其命名为“肾综合征出血热”(hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome，HFRS)。
肾脏是流行性出血热损害最为常见的靶器官。临床上，肾脏损害往往是流行性出血热最为突出的表现之一，有50%～60%的患者在临床上表现为急性肾功能衰竭，并成为造成患者死亡的主要原因。流行性出血热的肾脏损害尽管病情凶险、危重，但绝大多数病例，如能尽早发现，及时有效地给予治疗，即使是病情极为严重的病例，在救治成功后，其肾脏损害也可痊愈，而不遗留慢性病变，更绝少转化为慢性肾功能衰竭。流行性出血热作为一种传染性疾病，有其传染源、传播途径及流行规律。
不同类型的流行性出血热病毒，在不同的国家或在不同的地区，受经济状况、卫生条件等因素的影响，其易感人群不同，流行方式也有所差异。在我国，本病有由北向南，由农村向城市推移的趋势。按照流行方式，流行性出血热大致可分为以下三种类型：
1.农村型以黑线姬鼠为传染源，临床表现典型，病情往往较重，出血现象和肾脏损害明显，病死率较高。在我国多见于春末和晚秋两个高峰季节。
2.城市型以褐家鼠为传染源，临床表现往往较轻而不典型，易被漏诊或误诊。
3.实验室感染型临床表现较轻，大都无严重的肾功能障碍。现今认为，引起农村型流行性出血热的病毒是汉坦病毒，而引起后两种类型的病毒主要是汉城病毒。至于在北欧流行的临床表现较轻的“流行性肾病”，现已查明系普乌马拉病毒感染。
流行性出血热的病原是布尼亚病毒科(Bunyav’iridae)的汉坦病毒属(Hantavirus，HV)病毒。能引起肾综合征出血热的病原包括汉坦病毒属的汉坦病毒(Hantaanvirus，HTNV)、汉城病毒(Seoulvirus，SEOV)、普马拉病毒(Puumalavirus，PUUV)，以及贝尔格莱德-多布拉伐病毒(Belgrade-Dobravavirus，BDOV)等型。我国的流行性出血热主要是汉坦病毒和汉城病毒所引起。普马拉病毒主要在欧洲引起流行性肾病(nephropathicepidemica，NE)。贝尔格莱德-多布拉伐病毒在东南欧引起较重型HFRS。
流行性出血热病毒为单股负链RNA病毒，形态呈圆形或卵圆形，有双层包膜，外膜上有纤突。平均直径为120nm，其基因RNA可分为大、中、小三个片段，即L、M和S。分子量分别为2.7×106，1.2×106和0.6×106。指纹图谱分析表明病毒RNA的3个片段都是独特的，不同病毒株有差异，其中S基因含1696个核苷酸，编码核壳蛋白(含核蛋白NP)。M基因含3616个核苷酸，编码包膜糖蛋白，可分为G1和G2。一个基因编码聚合酶，含6533个核苷酸。核壳蛋白(含核蛋白NP)是病毒的主要结构蛋白之一，它包裹着病毒的各基因片段。G1和G2糖蛋白构成病毒的包膜(图1)。
我国分离的汉坦病毒A9株的M和S基因片段核苷酸序列与代表株76～118株的核苷酸同源性为84.57%，氨基酸的同源性为96.83%。汉城病毒R22、HB55株与代表株Seoul。80～39株的核苷酸同源性分别为95.3%和95.6%，氨基酸的同源性分别为98.9%和99.4%。近年来我国发现HTNV至少有8个亚型，SEOV有6个亚型。甚至还发现新的基因型病毒，这可能与汉坦病毒间基因重排有关。实验已证实汉坦病毒与汉城病毒间可以发生基因重排。
流行性出血热病毒的核蛋白有较强的免疫原性和稳定的抗原决定簇，一般认为核蛋白中含补体结合抗原，而不含中和抗原。宿主感染后核蛋白抗体出现最早，病程第2～3天即能检出，有利于早期诊断。膜蛋白中含中和抗原和血凝抗原，但组特异性中和抗原和血凝抗原主要存在于G2蛋白上。由于膜蛋白中具有血凝活性，可产生低pH依赖性细胞融合，这种功能可能对病毒颗粒黏附于受感染宿主的细胞表面及随后病毒脱核壳进入胞质起重要作用。
不同宿主携带的病毒致病力相差极大，这与宿主动物的类别有关。近年来越来越多的资料表明，每种已知的汉坦病毒都主要与单一鼠种相联系，有的称之为“原始宿主"。各种汉坦病毒与其特有的原始宿主间存在着一个长期共演化的关系。Jeor等曾反复捕捉和释放接种汉坦病毒的同一啮齿动物，观察其体内的自然带毒情况，结果发现同一株病毒在同一类啮齿类动物中，在整个捕捉和释放两次或以上过程中，分离到的病毒基因不论是M片段、S片段或非编码区片段均完全一致，但在不同种的啮齿动物接种同一株病毒，以上基因片段的序列则有改变。Kariwa等也发现不同年代从捕获褐家鼠中分离的Seoul病毒株，其G1和G2氨基酸同源性大于99.7%。证明汉坦病毒有其特殊的宿主动物依赖性。其次，汉坦病毒的毒力也与病毒本身的基因有关，主要是M片段编码的产物，糖蛋白1(G1)和糖蛋白2(G2)。不同血清型的汉坦病毒，G1编码区同源性低于G2，抗G1的McAb与各血清型病毒间的交叉反应明显少于G2，表明G1区是编码型特异性的抗原决定簇，而G2为组特异性抗原决定簇。在布尼亚病毒G1是决定病毒毒力和感染性的主要因素，同型病毒间基因片段经过重排(rearrangment)形成的病毒变异，病毒蛋白质糖基化方式的改变及基因突变均可引起病毒毒力的改变。此外，人的基因也在病毒和机体互相作用中起重要作用。Mustonen等检测了NE患者的HLA分型，发现重型患者HLA-B8和DRBI0301等位基因检出率，明显要高于对照组。其中休克患者检出率为100%(7/7)，因急性肾衰竭需进行透析者13例，其中HLA-B8阳性9例(69%)，DRBI0301阳性者8例(62而对照组却为15%，这汉坦病毒类等位基因可能导致感染汉坦病毒者增强或引起异常的免疫应答有关。
流行性出血热病毒对乙醚、氯仿、丙酮等脂溶剂和去氧胆盐敏感，4～20℃温度下相对稳定，高于37℃及pH5.0以下易灭活。56℃30min或100℃1min可灭活。对紫外线、乙醇和碘酒敏感。
流行性出血热肾脏损害的临床表现不同患者之间差异很大，不仅在临床表现而是在病程的每一个时期，其严重程度均可存在明显差异。一般而言，中、重度病例都伴有比较明显的肾脏损害，严重者可表现为典型的少尿型急性肾功能衰竭。
流行性出血热在其病程的不同时期，肾脏损害的临床表现如下：
1.发热期初始尿检无异常，蛋白尿常在第5天左右突然出现，严重者达3＋，并伴有镜下血尿。血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)偶有升高。肾小管功能检查可见尿NAG酶、溶菌酶升高，尿比重下降。
2.低血压休克期血BUN开始上升，少尿和BUN升高可发生在休克和低血压出现之前。尿检可有大量蛋白尿，重症病例24h尿蛋白质定量通常高于3.5g；尿沉渣中可见管型、红细胞及白细胞成分，重症病例可出现肉眼血尿，并可见由血浆蛋白质及细胞碎屑凝聚而成的膜状物。尿液中出现膜状物系流行性出血热的特征性表现之一，对提示本病具有一定临床价值。
3.少尿期少尿在早期即可发生，尤其是出现休克的患者，少尿更为明显。少尿的程度与疾病的严重程度相关。进入少尿期，往往是流行性出血热达到了极期，此时临床上可突出表现为BUN的急骤升高；典型的高分解急性肾衰；代谢性酸中毒；电解质平衡紊乱；水肿以及急性呼吸功能衰竭等。出血性表现，如肉眼血尿、皮下出血、球结膜下出血、咯血、胃肠道出血等，在此期也往往最为严重。不少患者在此期内可死于严重的并发症。
4.多尿期随着利尿的出现，绝大多数患者的病情开始逐步改善，尿量增多，每天的尿量常达4000～6000ml，甚或更多，此后逐渐进入恢复期。多尿期每天排出的尿量与病情的严重程度有关，也与肾脏损害的程度有关。多尿期的初期，血BUN仍可继续上升，随后则逐步下降。蛋白尿随着利尿的出现将逐渐减少，以至消失。但原来病情严重者，因其体质在此期仍非常虚弱，故可出现各种水电解质平衡紊乱。原有脱水者，大量利尿后还可迅速出现严重的液体负平衡，以致再次发生休克。
此外，多尿期出现的感染、大出血、严重水电解质及酸碱失衡、继发性休克等并发症，还可诱发第2次肾功能衰竭，使病死率明显增加。故对于进入多尿期的患者，临床上仍不可掉以轻心。
5.恢复期进入此期的患者，除仍有多尿及尿浓缩功能减退之外，已没有更多的临床症状和体征。病程超过2个月后，多数患者的尿浓缩功能可以恢复。但少数存活下来的极严重病例，其恢复期可持续很长时间，贫血及尿浓缩功能减退可持续4个月以上。
急性肾功能衰竭是重症流行性出血热肾脏损害的主要表现。典型病例绝大部分表现为少尿型急性肾功能衰竭。但近年来，国内外还陆续发现部分非典型肾脏损害病例，其具体类型有以下几种：
(1)顽固性肾衰：多见于重型和危重型病例，临床表现为持续高热1周以上，顽固性休克，严重出血，持续少尿、无尿可长达5～7天，尿中可见膜状物等。该型病例除肾脏损害之外，还常并发急性呼吸窘迫综合征、脑水肿、继发感染等，并对血液透析治疗效果较差。
(2)二次肾功能衰竭：是指患者在进入多尿期或恢复期，尿毒症逐渐消除后，病程中再次出现低血压、休克、少尿、无尿、尿毒症症状，使病情迅速恶化。其原因可能与补液不足，严重出血或继发感染等因素有关。此种情况临床治疗往往较为困难，病死率较高。
(3)肾破裂：国外尸检发现，自发性肾破裂占本病直接病死率的5%～15%。近年国内报告的病例数也在逐渐增多。自发性肾破裂多见于重症病例肾衰的极期和利尿早期。临床上主要表现为：
①患侧腰部突然剧烈疼痛、极度衰竭、冷汗、面色苍白。
②由于大量出血和腹膜后血肿，腰肌紧张呈板样强硬，若出血进入腹腔，则出现腹膜刺激征。
③尿量骤然减少。
④失血性休克。
⑤X线平片显示患侧肾脏与腰大肌阴影消失。
(4)非少尿型急性肾衰：近年来，国内报道的非少尿型急性肾衰病例数在逐渐增多，其中尤以城市型更为多见。患者在临床上虽无明显少尿，但氮质血症明显，预后较好。
1.腔道出血呕血、便血最为常见，可引起继发性休克。腹腔出血、鼻腔和阴道出血等均较常见。
2.中枢神经系统并发症包括发病早期因病毒侵犯中枢神经而引起脑炎和脑膜炎，休克期和少尿期因休克、凝血功能障碍、电解质紊乱和高血容量综合征等引起的脑水肿，高血压脑病和颅内出血等，可出现头痛、呕吐、神志意识障碍、抽搐、呼吸节律改变或偏瘫等。CT检查有助于以上诊断。
3.肺水肿是本病常见的合并症，临床上有两种情况。
(1)急性呼吸窘迫综合征(ARDS)：这是肺毛细血管损伤，通透性增高使肺间质大量渗液，此外肺内微小血管的血栓形成和肺泡表面活性物质生成减少均能促成ARDS。临床表现为呼吸急促，30～40次/min。早期没有明显发绀和肺部啰音，中期可出现发绀，肺都可闻及支气管呼吸音和干湿啰音。X线胸片，可见双侧斑点状或片状阴影，肺野外带阴影浓，而边缘薄，呈毛玻璃样。血气分析动脉氧分压(Pa02)降低至8.0kPa(60mmHg)以下，并进行性降低。肺泡动脉分压明显增高，达4.0kPa(30mmHg)以上。常见于休克期和少尿期。新近美国报告发生在新墨西哥州等地的汉坦病毒肺综合征，以ARDS为主要表现。常于发病第2～6天内因呼吸窘迫导致急性呼吸衰竭而死亡。
(2)心力衰竭：可以由肺毛细血管受损，肺泡内大量渗液所致，亦可由高容量或心肌受损所引起，主要表现为呼吸增快，咳泡沫样粉红色痰，发绀和满肺啰音。
4.胸腔积液和肺不张普马拉病毒引起的出血热多见，Kanerva对125例PUUV引起的HFRS患者进行检查，发现28%的患者存在胸膜积液或肺不张，而肺水肿罕见。这些患者均有较明显的低蛋白血症，因而认为毛细血管漏出及炎症可能是肺部异常的原因。
5.继发感染多见于少尿期和多尿早期，以肺部和泌尿系感染以及败血症多见，为免疫功能下降和导尿等操作所致，易引起继发性休克而使病情加重。
6.自发性肾破裂多发生于少尿期，由于严重肾髓质出血所致。常因恶心、呕吐或咳嗽等，使腹腔或胸腔压力突然升高，引起肾血管内压力升高而促进出血。突然坐起或翻身，使腰大肌急剧收缩，肾脏受挤压亦易引起肾破裂。临床表现为患者突感腰部或腹部剧痛，严重者血压下降，冷汗淋漓。若血液渗入腹腔，可出现腹膜刺激征，腹穿有鲜血。B超检查能发现肾周围及腹腔包块中有液平段。如能及时手术能降低病死率。
7.心脏损害和心力衰竭汉坦病毒能侵犯心肌，而引起心肌损害，临床上常见为心动过缓和心律失常。由于高血容量综合征、肺水肿等使心肌负担过重，因而可出现心力衰竭。
8.肝损害4%～60%患者ALT升高，少数患者出现黄疸或明显肝功能损害，肝损害以SEOV感染多见。是病毒损害肝脏所致。
9.高渗性非酮症昏迷极少数HFRS患者在少尿期或多尿期出现表情淡漠、反应迟钝、嗜睡甚至昏迷。检查血糖明显升高，常大于22.9～33.6mmol/L，血钠＞145mmol/L，尿酮阴性，血浆渗透压＞350mmol/L。这是HFRS患者胰腺β细胞受病毒侵犯使胰岛素分泌减少，或过量使用糖皮质激素、静脉补糖、补钠过多和过度利尿导致脱水所致。
1.血常规
(1)白细胞计数：第1～2病日多属正常，第3病日后逐渐升高，可达(15～30)×109/L。少数重症患者可达(50～100)×109/L。
(2)白细胞分类：发病早期中性粒细胞增多，核左移，有中毒颗粒。重症患者可见幼稚细胞呈类白血病反应。第4～5病日后，淋巴细胞增多，并出现较多的异型淋巴细胞。由于异型淋巴细胞在其他病毒性疾病时亦可出现，因此不能作为疾病诊断的主要依据。
(3)血红蛋白和红细胞：由于血浆外渗，导致血液浓缩，所以从发热后期开始至低血压休克期，血红蛋白和红细胞数升高，可达150g/L和5.0×1012/L以上。
(4)血小板从第2病日起开始减少，一般在(50～80)×109/L，并可见异型血小板。
2.尿常规
(1)尿蛋白：第2病日即可出现，第4～6病日尿蛋白常达3＋或4＋。突然出现大量尿蛋白，对诊断很有帮助。部分病例尿中出现膜状物，这是大量尿蛋白与红细胞和脱落上皮细胞相混合的凝聚物。
(2)显微镜检：可见红细胞、白细胞和管型。此外尿沉渣中可发现巨大的融合细胞，这是EHF病毒的包膜糖蛋白在酸性条件下引起泌尿系脱落细胞的融合。这些融合细胞中能检出EHF病毒抗原。
3.血液生化检查
(1)血尿素氮及肌酸酐：多数患者在低血压休克期，少数患者在发热后期，尿素氮和肌酸酐开始升高，移行期末达高峰，多尿后期开始下降。
(2)血酸碱度：发热期血气分析以呼吸性碱中毒多见，这与发热及换气过度有关。休克期和少尿期以代谢性酸中毒为主。
(3)电解质：血钠、氯、钙在本病各期中多数降低，而磷、镁等则增高，血钾在发热期、休克期处于低水平，少尿期升高，多尿期又降低。但亦有少数患者少尿期仍出现低血钾。
(4)凝血功能：发热期开始血小板减少，其黏附、凝聚和释放功能降低。若出现DIC血小板常减少至50×109/L以下。DIC的高凝期出现凝血时间缩短。消耗性低凝血期则纤维蛋白原降低，凝血酶原时延长和凝血酶时间延长。进入纤溶亢进期则出现纤维蛋白降解物(FDP)升高。
4.特殊检查
(1)病毒分离：发热期患者的血清、血细胞和尿液等标本接种Vero-E6细胞或A549细胞中，可分离出汉坦病毒。
(2)抗原检查：早期患者的血清、外周血的中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞，以及尿和尿沉渣细胞，应用汉坦病毒的多克隆或单克隆抗体，可检出汉坦病毒抗原。常用免疫荧光或ELISA法，胶体金法则更为敏感。
(3)特异性抗体检测：包括血清中检测特异性IgM或IgG抗体。IgM抗体1∶20为阳性，发病第2天即能检出。IgG1∶40为阳性，1周后滴度上升4倍有诊断价值。目前认为核蛋白抗体的检测，有利于早期诊断，而G2抗体的检测，则有利于预后判断。新近国外研究免疫色谱快速试验以重组核蛋白(NP)为抗原来检测患者的IgM抗体5min能出结果，敏感性和特异性均为100%。
(4)PCR技术：应用RT-PCR方法检测汉坦病毒RNA，敏感性高，可作早期诊断。
一般依据临床特点、实验室检查和结合流行病学资料，在排除其他疾病的基础上，进行综合性诊断，典型病例诊断不难，但在非疫区，非流行季节以及症状不典型的病例较难确诊，必须依赖特异性血清学协助诊断。本病早期诊断要点为：
1.在流行地区、流行季节如有原因不明的急性发热病人，应想到本病的可能。
2.发热伴有头痛、眼眶痛、腰痛、全身痛及消化道症状。
3.查体时应特别注意充血、水肿、咽部及软腭充血、皮肤瘀点及腋下出血点和肾区叩痛等。
4.发热病人早期出现尿蛋白阳性而且迅速增加，应按疑似出血热对待。
5.血象检查发现血小板减少，出现异型淋巴细胞对本病诊断有帮助。
6.血清特异性检查IgM或双份IgG抗体，或作血液白细胞病毒抗原检测，阳性可确诊。
本病病程经过应具备发热、出血、肾损害三大主征。其病程中多有发热、低血压、少尿、多尿及恢复期等5期经过。如经合理治疗或轻型病例可不出现低血压及少尿期，但多有发热及多尿2期，重者可有2期或3期重叠现象。
1.疫情监测由于新疫区不断扩大，因此应作好鼠密度、鼠带病毒率和易感人群的监测工作。
2.防鼠灭鼠应用药物、机械等方法灭鼠，一般认为灭鼠后汉城病毒所致EHF的发病率能较好地控制和下降。
3.作好食品卫生和个人卫生防止鼠类排泄物污染食品，不用手接触鼠类及其排泄物。动物实验时要防止被大、小白鼠咬伤。
4.疫苗注射目前我国研制的沙鼠肾细胞灭活疫苗(汉坦型)、地鼠肾细胞灭活疫苗(汉城型)和乳鼠脑纯化汉坦病毒灭活疫苗。均已在临床试用。经0，7，28天或0，1，2个月，3次各注射疫苗1ml后，80%～100%能产生中和抗体。但持续3～6个月后明显下降，1年后需加强注射。关于基因重组疫苗，国外研究应用重组PUUV。核壳蛋白(NP)疫苗在动物试验中能获得完全保护，应用汉坦病毒及汉城病毒M基因的G1和G2DNA疫苗在动物中能产生高水平的中和抗体。Meclain等应用汉坦病毒M和S片段克隆的重组疫苗进行1、2期临床试验表明重组疫苗是安全的，健康志愿者经两次注射后能产生较高的中和抗体。在我国重组疫苗亦在研究中。
